三)、试验结果：初代培养：使用本发明的消毒方法，消毒成功率能达到80％，诱导培养基萌芽率能达到90％，可以成功建立无菌再生体系。继代培养：使用本发明的增殖培养基，绣球组培苗增殖倍率能够达到8～10倍，组培苗高度一致，生长健壮。生根培养：使用本发明的生根培养基，绣球组培苗生根率能够达到95％，根系发达，健壮，可以成功用于移栽大棚。本发明所指ms培养基是murashige和skoog研制的培养基，其成分配方表见表1。1/2ms培养基是指大量元素含量为ms培养基的一半，其他成分用量相同。表1、ms培养基成分表本发明涉及的植物生长调节剂有：6-ba—6-苄氨基嘌呤；ga3—赤霉素；iba—吲哚丁酸，naa—萘乙酸。本发明中的诱导培养基、增殖培养基和生根培养基均为液体培养基。本具体实施方式的实施例均为本发明的较佳实施例，并非依此限制本发明的保护范围，故：凡依本发明的结构、形状、原理所做的等效变化，均应涵盖于本发明的保护范围之内。MEM培养基提供了细胞生长所需的基本环境。西藏基础培养基常用知识
从而提高菌株增殖速率，但是浓度过大会导致抑菌现象，后期菌株增殖放缓，以产酸为主，2-羟基乙胺还能够作为阳离子表面活性剂，使得细胞壁疏松，提高细胞通透性，促进谷氨酸释放到发酵液，从而提高了谷氨酸产量和糖酸转化率。三、通过上述实验确定cecl3添加量为10mg/l、2-羟基乙胺的添加量40mg/l，在此基础上，研究发酵培养基b对菌体浓度、谷氨酸含量以及糖酸转化率的影响。对照组1采用发酵培养基a进行发酵，不采用发酵培养基b，100l发酵罐中含有70l发酵培养基a；发酵工艺参照实施例1。对照组2：发酵培养基b中不添加琥珀酸，其余同实施例1。对照组3：发酵培养基b中不添加壳聚糖，其余同实施例1。对照组4：发酵培养基a中添加5g/l的琥珀酸，其余同对照组1。实验组为实施例1。具体结果见表1。表1组别菌浓度od600nm谷氨酸产量g/l糖酸转化率％对照组：对照组1采用单一发酵培养基发酵，谷氨酸产量和糖酸转化率明显低于实验组，各组别菌体浓度差异并不大；对照组4在对照组1的基础上添加了琥珀酸，对菌体浓度并没有影响，谷氨酸产量和糖酸转化率也没有明显差异，可能原因是，发酵前期以菌体增殖为主，产酸较少，琥珀酸对菌体增殖并没有明显的刺激作用。西藏基础培养基常用知识无酚红培养基减少了酚红对细胞的影响。
维持15-20分钟，可杀灭所有的繁殖体和芽胞。本法适用于耐高温、耐湿物品的**，如普通培养基、生理盐水、手术敷料等。（二）下向主要介绍高压蒸气**器**效果的验证方法高压蒸气**器使物品**后达到无菌要求，这是**实验中的基本保证。高压**器**效果是否合格足实验成败的**基础**关键的首要步骤。除少数培养基只需加热溶解，不需高压**外，大部分培养基均需121℃高压**15-30分钟。尤其是对无菌试验培养基**不彻底，直接关系到对**的无菌试验结果。因此必须认真对高压**器进行**效果的验证。为此我们提供了进行**效果验证的一个简易可行的方法。1．试验材料(1)嗜热脂肪芽胞杆菌纸片。嗜热脂肪芽胞杆菌(Bacillusstearothermophilus)ATCC7053是本法常用的生物指示菌，含芽胞量5-lO5CFU/片。(2)121℃压力蒸气**化学指示卡。(3)溴甲酚紫胨水培养基116℃高压**20分钟后备用。(4)O—150℃留点温度计。2．方法与结果将嗜热脂肪芽胞杆菌纸片（以下简称菌片）用无菌镊子放人密封试管中。化学指示卡和留点温度计放入敞口试管中。以上两种试管各准备5-10份。分别放置在高压**器蒸气口处、底部排气口处及底部出水口处或上下左右中间5处。如**器为二层，则需放10处。
附图说明图1是1/2cs和1/2ms两种培养基上，哥伦比亚型拟南芥无菌苗培养的对比效果图，a：无菌苗在培养基中生长情况；b：无菌苗莲座叶及根系发育；c：萌发率；d主根长度；a和b中bar＝；图2是1/2cs和1/2ms两种培养基上，兰兹贝格型拟南芥无菌植株培养的对比效果图，a：无菌植株在培养基中生长情况；b：无菌植株地上部分及根系发育；c：无菌植株花***发育(左)和花粉的亚历山大染色(右)；d：主根长度；e：株高；f：莲座叶长度；g：成熟花粉活力；a中bar＝、b中bar＝、c中花***bar＝、c中花粉bar＝15um；图3是1/2cs和1/2ms两种培养基上，油菜无菌苗培养的对比效果图，a：无菌植株在培养基中生长情况；b：无菌苗地上部分及根系发育；c：茎高；d：茎中粗；e：主根长；f：大于；a中bar＝、b中bar＝；图4是1/2cs和1/2ms两种培养基上，马铃薯无菌苗培养的对比效果图，a：无菌植株在培养基中生长情况；b：无菌苗地上部分及根系发育；c：茎高；d：茎中粗；e：根数；a和b中bar＝；图5是cs和ms两种培养基上，哥伦比亚型拟南芥叶片及根愈伤**诱导的对比效果图，a：叶片愈伤**；b：叶片愈伤**诱导率；c：根愈伤**；d：根愈伤**诱导率；a和c中bar＝；图6是cs和ms两种培养基上。MEM培养基是细胞生物学研究中的基础培养基之一。
因为解冻时可能会有营养成份析出，影响培养效果。正常情况下于2~8℃避光保存，使用前从冰箱取出，放入室温进行平衡。通常的液体培养基有效期是6个月到12个月。液体细胞培养基尽量避免长期贮存，其中的谷氨酰胺会随着储存时间的延长而慢慢分解，如果细胞生长不良，可考虑检测培养基中的谷氨酰胺含量确定是否再补加谷氨酰胺。市售商业化液体细胞培养基有具体的有效期，对于使用干粉细胞培养基自行配制成液体以后，也应低温（2~8℃）贮存。除培养基中如谷氨酰胺易降解之外，培养基中的其他成份随着温度的升高也可能会发生降解或是析出。5.细胞培养基使用过程中常见问题分析由于大多数细胞适宜的pH为，偏离此范围可能对细胞生长产生有害的影响。但各种细胞对pH的要求也不完全相同，原代培养的细胞一般对pH变动耐受力差，无限细胞系耐受力强。因此，原代培养时，培养液中的缓冲系统就显得较为重要。一般的细胞培养基采用的都是平衡盐系统，但不同的培养基或是同一系列的培养基所用平衡盐系统不同，如199系列、MEM系列均有Hanks’系统的培养基及Earle’s系统的培养基。有些培养基不是上述常规的平衡盐系统，例如RPMI1640培养基、F12培养基。MEM培养基提供了丰富的营养成分，支持细胞的快速增殖。西藏基础培养基常用知识
RPMI1640培养基能够提高细胞的存活率。西藏基础培养基常用知识
如何正确地使用培养基及**大程度地保持培养基的营养以维持细胞的生长，对每个培养者都很重要。培养基的使用依不同的培养基种类、培养方式、细胞种类的不同而存在差异。细胞培养液的构成细胞培养液指细胞生长的液体环境，一般指完全培养液，添加了血清、水解乳蛋白、各种添加剂等可以直接使用的培养液。细胞培养基&血清模式血清对于在传统培养基配方中生长和增殖的大多数细胞系来说是需要的，因为大多数单独的培养基并不能提供细胞生长所需要的全部营养，如MEM培养基，较为常用的量为5％～10％的比例，而特殊的低血清培养基血清量可降至3％左右，细胞的形态和功能不受影响。细胞培养基&乳欧液模式化学合成培养基现虽已大规模使用，但在某些培养领域水解乳蛋白仍在使用，以补充培养液中缺乏的氨基酸、小肽物质。较为常用的方式是用汉氏（Hanks’BSS）或欧式(Earle’sBSS)平衡液溶解水解乳蛋白（一般为5‰浓度），即成乳汉（欧）液，再与化学合成培养基（一般为MEM）按比例混合使用（如1：1）。细胞培养基&各类添加剂（生长因子等）模式成分复杂的培养基还含有许多化合物，包括蛋白质、多肽、核苷、柠檬酸循环的中间产物、**酸及脂类等。西藏基础培养基常用知识
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